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大米酶解蛋白的研究进展

大米
大米主要由淀粉和蛋白质组成,其中,淀粉占大米总重约80%,蛋白质只占总重的8%左右。

大米蛋白按照溶解性的不同,可分为四类:1.水溶蛋白,清蛋白2.盐溶蛋白,球蛋白3.醇溶蛋白4.碱溶蛋白,谷蛋白;谷蛋白和醇蛋白也称为贮藏蛋白,是大米蛋白的主要成分。

大米

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大米蛋白的提取工艺

1、酶法制备:

酶法提取的一种思路是利用蛋白酶对大米蛋白的降解和修饰作用, 使其变成可溶性的肽而被提取出来。这种方法反应条件温和, 蛋白质多肽链可水解为短肽链, 提高了蛋白质的溶解性。

大米酶解工艺

大米酶解工艺

酶解法使蛋白的疏水性提高,可以有效地提高其溶解性、乳化性和起泡性,其缺点在于生产成本较高,所使用酶不同,提取率差别较大。按照蛋白酶作用条件的不同, 可以分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶等。

2、碱溶酸沉淀法:

碱液可以使大米中紧密的淀粉结构变得疏松,同时碱液对蛋白质分子的次级键特别是氢键具有破坏作用,并可使某些极性基团发生解离,使蛋白质分子表面具有相同的电荷。从而对蛋白质分子有增溶作用,促进了淀粉与蛋白质的分离。

碱溶酸沉淀法

碱溶酸沉淀法

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蛋白酶对大米蛋白的酶解作用

基于大米蛋白水溶性不佳,且非蛋白成分主要是碳水化合物的特点,提取的蛋白质应该进一步纯化(Purification)。还可以用纤维素酶、果胶酶及异淀粉酶等处理,促进更多碳水化合物的溶解。

1、碱性蛋白酶改性大米蛋白的工艺

碎米→浸泡→湿磨 →米浆液→调浆

大米粉:碱液(0.06mol/L) =1:8→室温搅拌提取 2h→3500r/min 离心 20min→取上清液→调 pH 至 4.8 等电点酸沉→3500r/min 离心10min→沉淀→冷冻干燥→碱提大米蛋白

碱提大米蛋白粉→5%(w/v)大米蛋白悬浮液→室温水化溶解 1h→55℃超级恒温水浴→按不同的加酶量、底物浓度、pH 进行酶解(pH-Stat[76]法使体系 pH 稳定,测定水解度) →3500r/min 离心 20min→上清液→85℃ /10min灭酶→真空浓缩→冷冻干燥→大米蛋白酶解物

碱性蛋白酶 Alcalase 改性得到的大米蛋白酶解物相比碱提酸沉大米蛋白,溶解度增大了 13.92 倍,乳化性增大了 3.07 倍,乳化性稳定性增大了 2.26 倍,起泡性增大了 1.07 倍,泡沫稳定性增大了 1.21 倍,大米蛋白酶解物的功能性质均有不同程度的改善。

与纪崴等采用 Protease N 水解大米蛋白相比,Alcalase酶解产物溶解性的提高更为显著;与蒋甜燕采用酸法脱酰胺改性的蛋白质溶解度的提高相接近;与玄国东、郭荣荣、彭清辉研究酶解对改善大米蛋白溶解性的结论一致,蛋白质的溶解性都达到了90%以上。

2、胃蛋白酶改性大米蛋白的工艺

工艺流程:大米蛋白→胃蛋白酶水解→灭酶→测上清液蛋白质量浓度→调pH 值至7.0 →透析→冷冻干燥→测定蛋白质的功能性质。

胃蛋白酶对大米蛋白溶解性有一定的改善作用,影响因素依次是pH 值>酶添加量>水解时间>温度。最优参数为酶添加量7.0U/g、pH1.5、水解时间5h、温度3 0 ℃。水解大米蛋白的功能性质比未经处理的大米蛋白高。

其中,乳化稳定性与乳化性分别为3 3 . 2 8mi n 、0.456,甚至高于大豆蛋白和鸡蛋清蛋白。起泡性和起泡稳定性分别为25.0%、82.4%,持水性和持油性为2.80、3.30g/g,分别是未经处理的大米蛋白的2.09、2.92 倍。

大米

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小结

综上所述,大米蛋白的氨基酸组成合理,生物学效价高,过敏性低,具有较高的营养价值。通过酶解手段,增加大米蛋白的溶解性,提高乳化性、乳化稳定性,持水性和持油性,改善大米蛋白品质,使其更容易被动物吸收利用。我国是稻米生产大国,具有丰富大米资源,这为大米蛋白的开发利用提供了基础,大米蛋白作为极具开发价值的植物蛋白资源, 为解决我国饲料蛋白资源不足问题提供了一条可行途径。

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